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骨鹼性磷酸酶檢查什麼

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骨鹼性磷酸酶檢查什麼

骨鹼性磷酸酶,這是一個非常冗長的詞語,現象學習生物的同學們應該比較熟悉了。一說起骨鹼性磷酸酶,我們會聯想到它的檢查方法。那麼,骨鹼性磷酸酶怎麼檢查呢?接下來,小編就爲大家詳細介紹一下這方面的內容,希望對大家有所幫助哦。

在反應裝置的加樣孔中,均勻滴加兩滴洗滌液。待其滲入,目的在於加隨後的全血樣品滴加後滲濾順利,血球和血漿分離較快,其滲入一般較快,如滲入緩慢,可用手輕壓一下血漿分離器,即可迅速滲入。如漏加洗滌液,則有可能使樣品血漿分離緩慢且不均勻,將影響下一步親和反應及顯色反應,最後人爲地使顯色斑點均一性差。

試劑盒要求使用新鮮全血,不能使用抗凝血。因某些抗凝劑會抑制BAP的活性。採血時試劑盒是配套的30µl定量採血管,手持有黃線的一端,用另一端吸取血液標本恰好至黑色刻度線,然後用吸球迅速將其均勻加入加樣孔中,注意勿產生氣泡。如用血清分析,則需加17/J 1。加樣後,血液一般在30秒內可全部滲入。如滲透較慢,可用手輕壓一下分離器。

待血液全部滲入後,再逐滴加入兩滴洗滌液。由於此時膜表面已截留了血球。所以此時洗滌液滲濾較慢,一般約需1—2分鐘。如個別又出現滲入較慢的,也可用手輕壓分離器,即可加快滲入速度。

待洗滌液滲入後,此時樣品中血漿已完全轉運到親和膜上,將血漿分離器從反應裝置上取下,即可見反應滑板上的圓形反應膜。注意膜上不能附着有其它膜片,如有可能爲分離器上的過渡膜鬆動脫落而成,此時應用鑷子或分離器一角將其挑去。

爲了除去血漿中其它物質的干擾,在反應膜上只保留BAP結合蛋白複合物,在反應膜上再滴加兩滴洗滌液(小兒型)或中止液(成人型),此時液體滲入較快。

推動反應滑板,使反應膜定位在反應孔的正中,此步驟使親和反應和酶促顯色反應在兩個不同的區域進行,以避免親和反應對顯色反應的干擾,提高檢測靈敏度和特異性。

在反應孔正中滴加一滴顯色液,置37℃恆溫水浴箱中按說明書上標明的反應時間進行保溫反應。滴加顯色劑時,應先將顯色劑平衡至室溫。注意:反應溫度指的是水浴箱內的氣溫,而非水的溫度;且反應裝置應放在試管架或別的支架上,切勿將反應裝置放在水中進行反應,放時也要注意避免反應膜上濺上水滴。顯色液正常的顏色爲淡黃色,在2-8℃避光條件下可穩定一年,如變藍或變成無色,可能是運輸過程中外界因素的影響所致,對檢測結果有一定影響,請勿使用並及時與供應商或公司技術服務部門聯繫。

顯色結束後,將反應滑板推回原位,此時反應膜上剩餘的顯色液將會被吸收掉,之後滴加一滴中止液,停止酶促顯色反應。因爲顯色反應時間已經出廠前校正確定,故實際顯色時間與說明書上標明的顯色時間應儘可能接近。

試劑盒使用的顯色系統是BCIP/INT,顯色產物是一種藍紫色色澱。正常小兒血漿BAP活性一般≤200U/L,~E常成人血漿BAP活性一般≤150U/L,鈣營養不良者血漿中BAP活性升高,隨鈣缺乏程度不同,反應膜上顯色強度不同。報告時,對照標準色板報告:

小兒:≤200U/L,250U/L,300U/L。如顯色偏離標準色板標明的數值,則可據目測實際報告爲200-250U/L,250-300U/L或>300U/L;

成人:≤150U/L,200U/L≤200U/L。如顯色偏離標準色板標明的數值,則可據目測,實際報告爲150-200U/L,200-250U/L或>250U/L。

以上便是小編爲大家介紹的關於骨鹼性磷酸酶怎麼檢查的一些內容,相信朋友們聽完小編具體詳細的介紹,對這方面內容有了新的瞭解了。我們日常生活中處處充滿了生物知識,所以學習生物知識真的很重要。空餘之際可以多看看一些生物,學習一些生物知識。

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